盐附子对小鼠的急性神经毒性作用
摘要: 目的 研究盐附子(SAC)对小鼠神经系统的急性毒性作用。方法 采用小鼠自发活动、爬杆、Morris水迷宫试验,分别设SAC生药7. 68、3. 84、1. 92g·kg- 1剂量组, ig给药,同时设阴性对照和阳性对照组。单次给药后15、60min用自发活动仪测定小鼠在10min内自发活动的次数;单次给药30min后将小鼠放在爬杆架的玻璃棒上,记录小鼠爬杆时间;连续给药4d,末次给药后30min进行水迷宫试验,以小鼠找到隐藏平台的时间为逃避潜伏期。结果 SAC高、中、低剂量组的小鼠自发活动次数、爬杆时间、逃避潜伏期与对照组相应指标相比,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论 SAC浓度为7. 68、3. 84、1. 92g·kg- 1时,未观察到其对小鼠神经系统的急性毒性作用。
关键词:盐附子; 自发活动次数; 爬杆时间; 逃避潜伏期; 神经毒性
附子Aconitumcarmichaeli为毛莨科植物乌头子根的加工品,因其附生乌头得名。附子的毒性成份为乌头碱,可溶于水与乙醇,毒性极大,人口服0. 2mg即可产生中毒症状,其结晶2～4mg即可致死。盐附子是泥附子经丹巴液盐浸、晒晾炮制加工而成,是临床上常用附子的炮制品。为其临床的**用药提供依据,特选用小鼠自发活动试验、爬杆试验、Morris水迷宫试验,研究了盐附子的急性神经毒性。
1 实验部分
111 试药、仪器与动物盐附子(SAC,生药1. 09 g·ml- 1)为深褐色液体,由泥附子经盐浸炮制加工而成;***注射液(天津金耀氨基酸有限公司, 5mg·ml- 1);氢溴酸东莨菪碱注射液(上海禾丰制药有限公司0. 3mg·ml- 1)。JXDH- Ⅰ自发活动仪(河北冀星试验仪器公司);Morris水迷宫系统(北京新天地科技有限公司);小鼠爬杆架(自制)。普通级健康成年昆明种小鼠[四川省实验动物专委会养殖场,生产许可证号SCXK(川)2004- 014]共150只,体重20～26g,♀♂兼用。小鼠饲养于中心的普通级小动物房,每笼5只,温度20℃～26℃,湿度55%±15%,照明时间12h/12h。将小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组和盐附子高、中、低剂量组。112 统计方法
结果用x±s表示,各组数据用SPSS11. 0统计软件进行单因素方差分析。
1. 3 方法与结果
11311 自发活动试验 小鼠50只,随机均分为5组。SAC高、中、低剂量组小鼠分别ig生药7168、3184、1192g·kg- 1阴性对照组给予蒸馏水;阳性对照组给予***注射液5mg·kg
- 1。分别于给药后15、60min测定小鼠10min内自发活动的次数[1]。表1结果显示, SAC高、中、低剂量组小鼠的自发活动次数与相应的阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。SAC高剂量组小鼠与中、低剂量组的比较有所减少,但差异无统计学意义。11312 爬杆实验 按“1. 3. 1”项方法分组、给药。试验前训练小鼠两天,使其学会爬杆。给药30min后,将小鼠放在爬杆架的玻璃棒上,使肌肉处于静力紧张状态,记录小鼠由于肌肉疲劳从棒上跌落的时间,累计3次的爬杆时间作为总的爬杆时间。SAC高、中、低剂量组小鼠的爬杆时间与相应的阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。SAC高剂量组小鼠与中、低剂量组的比较有所减少,但差异无统计学意义。
11313 Morris水迷宫试验 将Morris水迷宫分为四个象限,平台置**象限离水面约1cm处。先将小鼠放在平台上使其熟悉平台30 s,再将小鼠从与平台相对的象限面壁放入迷宫,以小鼠找到隐藏平台的时间为逃避潜伏期。若120 s小鼠仍找不到平台,则引导小鼠至平台上,逃避潜伏期计为120 s。重复测定1次,取其平均值。除阳性对照组ip氢溴酸东莨菪碱注射液3mg·
kg- 1外,其余按“1. 3. 1”项方法分组、给药,各组均连续给药4 d。每次给药后30min进行水迷宫试验,取第4天的结果为正式试验结果。结果显示, SAC高、中、低剂量组小鼠的逃避潜伏期与相应阴性对照组的比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。
2 讨论
附子具有强心、**、镇痛、抗肿瘤、调节**功能等作用,但又是常见的有毒中药之一。其主要毒性成分为脂溶性二脂类生物碱,毒性表现为神经和心血管系统的严重损害。盐附子、黑顺片、白附片是临床上常用附子的炮制品,其中又以盐附子*为常用,故文中选用盐附子来研究其急性神经毒性。盐附子是附子的粗加工品,其毒性和药理作用与生附子相比变化不大,故文中试验结果也反映了生附子的急性神经毒性。实验采取神经行为测试组合来研究盐附子对小
鼠神经行为功能的影响。给药组与阴性对照组比较,差异均无统计学意义。但盐附子高剂量组小鼠自发活动次数和爬杆时间与其他组比较均有所减少,差异无统计学意义。可能原因是盐附子急性神经毒性较低,短期给药对小鼠自发活动次数和爬杆时间影响较小,故在较高的生药剂量下才出现较小的毒性。试验结果显示,盐附子生药浓度为7168、3184、1192g·kg- 1时,未观察到其对小鼠神经系统的急性毒性作用。
