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构菌菌丝酒提物的药效学研究

日期:2020-09-18 16:50
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摘要:

构菌菌丝酒提物的药效学研究
 
 摘要: 用东莨菪碱造成小鼠记忆获得障碍或用亚硝酸钠破坏小鼠记忆巩固, 用明暗箱法来观察菌丝酒提物对小鼠学习记忆障碍的改善作用; 用断头喘息法观察菌丝酒提物的抗氧化作用; 用游泳法观察菌丝酒提物的抗疲劳作用。结果显示, 小鼠灌胃菌丝酒提物能明显延长避暗实验中记忆障碍小鼠从明场进入暗场的潜伏期, 减少错误次数; 能显著延长小鼠断头喘息时间和小鼠在冷水中的游泳时间。说明菌丝酒提物具有较强的改善小鼠学习记忆障碍、抗氧化作用和抗疲劳作用。
关键词: 菌丝酒提物; 学习记忆; 抗氧化; 抗疲劳
食用菌 , 素有“素中之荤”的美称 , 不仅有很高的营养价值 , 而且还有很高的药用价值[1 ]。构菌是药食两用菌 , 俗称增智菇。我所生物合成室多年来在对多种构菌菌株进行筛选的基础上优选出的具有高产和显著生物活性的菌株 , 我所植化室对发酵物进行了分离提取 , 我们对其中的一个提取物 - 菌丝酒提物进行了一系列的药效学研究 , 以开发其药用价值。
1  材料
111 动物  ICR小鼠 , 18 - 22g , 雄性。
112 菌丝酒提物的制备  发酵菌丝用 70 %乙醇提取 , 得到菌丝酒提物。临用前用生理盐水 (NS) 配制成浓度为 (小) 015g/ kg、 (中) 1g/ kg、 (大)115g/ kg三个浓度。按011ml/ 10g体重给药。
113 试剂及仪器  氢溴酸东莨菪碱; 亚硝酸钠 (NaNO2); 多萘哌齐 (DO) 。明 暗 箱。
2  方法与结果
211  菌丝酒提物对东莨宕碱致小鼠学习记忆障碍的影响  ICR小鼠 60 只 , 体重 18 - 22g , 雄性 , 实验前在本实验室饲养两天以适应环境。实验时随机分为6组 , 每组10只。设正常对照组 (NS) 、模型对照组、菌丝酒提物 015g/ kg 组、菌丝酒提物 1g/kg组、菌丝酒提物115g/ kg组和阳**对照组 (多萘哌齐3mg/ kg) , 均灌胃给药。**天下午给受试**一次 , **天学习前先给受试** , 30min 后除正常对照组外 , 每组小鼠腹腔注射东莨菪碱1mg/ kg , 30min后将小鼠放进明暗箱中先适应环境3min , 然后给定电压为 36V , 进行学习 5min , 下午再给一次药。第三天先给一次药 , 30min 后进行记忆测试 , 记录小鼠**次进入暗箱的潜伏期及5min内进入暗箱的次数 (或称错误次数) 。结果见表1。模型组与正常对照组比 , 小鼠**次进入暗场的潜伏期明显缩短 ( P < 01001) , 错误次数明显增多 (P < 0101) , 给药组与模型组相比 , 菌丝酒提物015g/ kg、1g/ kg、115g/ kg剂量组均能明显延长小鼠**次进入暗场的潜伏期 , 呈量效关系 , 1g/ kg和115g/ kg剂量组能明显减少错误次数 (P < 0105) 。由小鼠**次进入暗场的潜伏期结果计算得到菌丝酒提物 015g/ kg、1g/ kg和 115g/ kg剂量组对小鼠学习记忆的改善率分别为5915 %、7918 %和9116 %。
 
 
212  对亚硝酸钠造成小鼠记忆巩固障碍的影响  
分组、给药同 211 项 , **天学习前先给受试** , 30min后除正常对照组外 , 每组小鼠皮下注射亚硝酸钠120mg/ kg , 30min后将小鼠放进明暗箱中学习 , 24h后进行记忆测试。结果见表 2。与模型组相比 , 菌丝酒提物 1g/ kg和 115g/ kg剂量组均能明显延长小鼠**次进入暗场的潜伏期 (P < 0105和 P < 0101) , 115g/ kg剂量组与多萘哌齐组小鼠**次进入暗箱的潜伏期都超过了正常对照组。1g/kg和 115g/ kg 剂量组能明显减少错误次数 ( P <0105) 。菌丝酒提物 015g/ kg、1g/ kg和 115g/ kg剂量组小鼠的记忆改善率分别为 5614 %、7713 %和11618 %。
 
213 对小鼠断头喘息的影响  ICR小鼠 40 只 , 体重18~22g , 雄性 , 随机分为 4 组 , 每组 10 只。设正常对照 NS组、菌丝酒提物 015g/ kg 组、菌丝酒提物1g/ kg组和菌丝酒提物 115g/ kg组 , 均皮下注射给药。小鼠皮下注射** 30min后 , 用剪刀迅速剪下小鼠头部 , 立即计时 , 记录小鼠头部脱离身体后张口喘息的时间。结果见表 3。小鼠被断头后菌丝酒提物组 1g/ kg 和 115g/ kg 与正常对照组比较 ,其喘息时间分别延长了4118 %和7217 % , 均有统计学差异 (P < 01001) 。菌丝酒提物 015g/ kg与正常对照组相比其喘息时间延长了 612 % , 具有统计学差异 (P < 0105) 。
 
214 抗疲劳作用  分组、给药同 213 项 , 灌胃给药。桶中放入19cm深的水 , 再用冰调节水温度至19℃。给药 30min 后 , 观察其在水中的游泳 (存活) 时间。结果见表 4。灌胃菌丝酒提物 015g/ kg、1g/ kg和115g/ kg 与正常对照组比较 , 游泳时间分别延长了3215 %、6419 %和9714 % , 均具有统计学差异 (P < 0105) 。
 
3  讨论
回避性条件反射方法已得到广泛应用, 但正常动物经一次训练即可学会逃避电击, 且很快趋于巩固,维持相当一段时间。在这种情况下观察**增强正常动物记忆的作用是困难的。采用记忆缺失的动物模型, 观察**改善动物记忆障碍的作用, 不但有助于评定**的作用, 且可初步分析**的作用机制[2]。东莨菪碱造成小鼠记忆获得障碍和亚硝酸钠造成小鼠记忆巩固障碍是国内外经常使用的较为成熟的模型,避暗法也是研究学习记忆的经典实验方法。**影响记忆可能有两种形式: ①**改变一般机能状态而影响记忆; ②**作用于与记忆有关的神经结构, 易化记忆过程[3]。已有研究表明, 东莨菪碱是M- 胆碱能受体阻滞剂, 亚硝酸钠是致脑缺氧剂。胆碱能路径是记忆的内在基础, 脑部缺氧可破坏记忆的保持[4]。因此我们采用上述模型来观察菌丝酒提物对小鼠学习记忆的作用。本研究结果提示, 菌丝酒提物015~115g/ kg对东莨菪碱造成的记忆获得障碍及亚硝酸钠造成的记忆巩固障碍都有较明显的改善作用,且此作用有量效关系。剂量越大, 作用越明显。说明菌丝酒提物可能具有胆碱能样作用, 尚需进一步的实验证明。断头喘息实验结果提示, 菌丝酒提物可促进需氧代谢, 改善脑缺氧, 为菌丝酒提物可改善亚硝酸钠造成的记忆巩固障碍提供了一个理论依据; 游泳实验结果提示, 菌丝酒提物有抗疲劳和抗寒冷作用, 其作用机制正在研究中。

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