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动物悬尾实验、强迫游泳实验实例（1）

动物悬尾实验、强迫游泳实验实例（1）
【摘要】  目的研究芒果苷(mangiferin)对实验性行为绝望小鼠的抗抑郁作用。方法采用小鼠悬尾应激实验和小鼠强迫游泳实验。结果芒果苷在60.0，30.0，15.0 mg·kg-1剂量下显著缩短小鼠悬尾不动时间（P﹤0.05或P﹤0.01），芒果苷60.0 mg·kg-1能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间（P﹤0.01）。结论芒果苷在小鼠行为绝望模型实验中具有一定的抗抑郁作用。
【关键词】  芒果苷 悬尾实验 强迫游泳实验 小鼠
　抑郁症是一类持续反复发作的情绪障碍、严重危害人类身心健康的常见精神疾病，其病理机制尚未彻底阐明，主要表现为情绪持久低落，思维迟钝，意志行为减少，严重者还伴有自杀倾向。现代城市生活节奏急速，压力沉重，抑郁症已经成为最常见的心理疾病之一，列世界十大疾病第五位［1，2］，而目前高效低毒的 治疗抑郁症药物较为贫乏，因此抑郁症的防治和抗抑郁新药的研制已成为当今国际医药界前沿热点研究课题之一。
芒果苷是一种四羟基吡酮的碳糖苷，属双苯吡酮类化合物，是芒果叶的主要成分之一。它具有抗应激［3］、抗脂质过氧化［4］，降血糖［5］、抗肿瘤、免疫调节［6］等作用。本研究利用小鼠行为绝望模型，研究芒果苷的抗抑郁作用。
  1 材料
1.1 药物芒果苷购由广西中医学院药学系，存放于干燥器中。实验时用吐温-80配成混悬液备用。盐酸氯米帕明片，上海九福药业有限公司，批号030823；利血平，上海医科大学红旗制药厂，批号030907。
1.2 动物健康昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18～22 g，由广西医科大学实验动物中心提供，合格证号：桂检证字(2000)第001号。
  2 方法
2.1 分组及给药将健康昆明种小鼠随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组（生理盐水）；阳性对照组（盐酸氯米帕明20.0 mg·kg-1）；芒果苷大、中、小剂量组（60.0，30.0，15.0 mg·kg-1芒果苷）。灌胃（ig）给药0.1 ml/10 g，1次/d，连续7 d。实验期间动物自由取食和饮水。
2.2 小鼠悬尾实验［7］末次给药1 h后，将小鼠尾部距末端约1 cm处用夹子固定，使其倒吊于距地面15 cm左右的横杆上，动物为克服不正常体位而挣扎活动，但活动一段时间后，出现间断性不动，显示失望状态，累计各组 8 min内的不动时间。
2.3 强迫小鼠游泳实验［7］末次给药1 h后，将小鼠放于直径约18 cm，水深18 cm，水温25℃的容器内，测定8 min之内小鼠漂浮不动的时间(即小鼠在水中停止挣扎，或动物呈漂浮状态，仅有细小的肢体运动以保持头部浮在水面)。
2.4 数据处理实验数据均以表示，组间比较用t检验。使用SPSS13.0统计软件进行。
  3 结果
3.1 小鼠悬尾实验在经典的小鼠悬尾抑郁模型中，连续给予相应药物7 d， 芒果苷在60.0，30.0，15.0 mg·kg-1剂量下显著缩短小鼠悬尾不动时间（P﹤0.05或P﹤0.01），阳性对照药盐酸氯米帕明20.0 mg·kg-1也显示同样作用（P﹤0.01）。见表1。表1 对小鼠尾悬实验不动时间的影响与空白对照组比较，*P﹤0.05，**P﹤0.01;n=10
3.2 强迫小鼠游泳实验小鼠在强迫游泳模型中出现漂浮不动状态反映了动物的绝望行为， 盐酸氯米帕明20.0 mg·kg-1，芒果苷60.0 mg·kg-1能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间（P﹤0.01），提示芒果苷在此模型上有抗抑郁作用，见表2。表2 对小鼠强迫游泳实验不动时间的影响与空白对照组比较，*P﹤0.05，**P﹤0.01；n=10
  4 讨论
抑郁症并非一般的情绪或性格问题，而是一种有明确生物学基础的疾病，是先天遗传因素、早年神经发育异常和后天不利环境因素共同作用的结果，其发病机理尚未完全清楚，可能涉及诸多因素的改变［1］：①中枢神经系统组织形态结构的改变，抑郁症患者可出现大脑和小脑均有萎缩、额叶萎缩和功能低下、海马神经元细胞的丢失和海马及额叶体积的减少等。②中枢单胺类神经递质和相应受体功能的变化，如去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT) 、多巴胺(DA)、乙酰胆碱(Ach)、γ-氨基丁酸(GABA)等的不足。临床常用的抗抑郁药基本上通过影响这些递质而产生作用。③神经内分泌功能的变化，下丘脑–垂体–肾上腺轴(hypothalamic-pituitary-adrenal axis，HPA) 功能异常在抑郁症的发生中起着非常重要的作用，研究显示抑郁症患者的血浆皮质醇分泌增加，失去了正常人夜间自发性分泌抑制的节律，整天处于肾上腺皮质功能亢进状态；肾上腺皮质增生、垂体也增大；④中枢神经系统结构、功能及神经内分泌功能在抑郁症发病过程中的相互作用，他们在抑郁症的发病过程中彼此影响，长期不愈的抑郁症将逐渐发展为经组织学改变为基础的不可逆的认知功能损害。
临床常用的抗抑郁药有：①三环类抗抑郁制剂如米帕明、氯米帕明；②单胺氧化酶抑制剂如吗氯贝胺；③选择性5-羟色胺(5-HT)再摄取抑制剂如氟西汀、舍曲林；④选择性去甲肾上腺素(NE)再摄取抑制剂如瑞波西汀；⑤NE和多巴胺(DA)再摄取抑制剂如安非他酮；⑥5-HT及NE再摄取抑制剂如文拉法辛；⑦NE能和特异性5-HT能抗抑郁剂如米氯平；⑧5-羟色胺2型受体(5-HT2)受体拮抗剂及5-HT2再摄取抑制剂如尼法唑酮、曲唑酮；⑨其他：噻奈普汀、圣约翰草、金丝桃素。这些药物心血管系统、神经系统、消化系统、泌尿系统等不良反应常见［8］。
小鼠悬尾实验和强迫游泳实验是行为药理实验中用于筛选和观察抗抑郁药物可靠的实验方法。强迫游泳实验是利用动物不能逃出恶劣环境，导致动物行为绝望的一种模型。实验时，将动物放在盛水的容器内强迫其游泳，动物最初的反应是游动，试图逃出，随之感到逃脱是不可能的，便不再挣扎和游动，仅将头部露出水面，肢体漂浮，维持一种不动状态，此中状态称为“行为绝望”。小鼠悬尾实验时，悬尾小鼠为克服倒悬体位，在实验初始表现为不停挣扎、扭动，希望能翻上来，但随之感到绝望，陷入一种不动状态［7］。本研究结果显示，芒果苷可显著缩短悬尾实验和强迫游泳实验小鼠的不动时间，表明在小鼠行为绝望模型实验中具有一定的抗抑郁作用。本文仅在芒果苷对实验性行为绝望小鼠的抗抑郁作用作了初步的探索，对其它动物模型的抗抑郁作用及机制还有待于进一步研究。
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